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Grado en Química

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30 

 

REACTIVOS Y MATERIAL  

 

Instrumentación:

 

 

 

Cromatógrafo de líquidos de alta resolución.  

Columna cromatográfica de fase Inversa: C18.  

Detector de absorbancia UV (λ= 254 nm) 

Flujo de la fase móvil: 2 mL/min 

 

Reactivos

:  

 

Cafeína (patrón puro)  

Metanol 

 

 

 

Agua Milli-Q   

Ácido acético 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Material

:  

 

1 Probeta de 100 mL 

6 matraces  aforados de 25 mL 

1 pipeta de 10 mL , otra de 25 mL y 5 mL 

Viales de 10 mL 

Filtros de muestra compatibles con metanol 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

PARTE EXPERIMENTAL 

 

1.-Preparar 1 L de una disolución: 30 % metanol/ 0.1 % ácido acético/ 69.9 % agua 

(≅ pH 3.5). 

Esta disolución se utilizará para preparar los patrones para el calibrado; la 

misma disolución se utiliza como fase móvil en el sistema cromatográfico, 

pero se da preparada porque hay que desgasificarla convenientemente, ya 

sea con una corriente continua de Helio o en un baño de ultrasonidos 

durante 5 minutos, y este proceso no puede realizarse en el laboratorio de 

prácticas. 

 

2.-Preparación de la curva de calibrado: A partir de la disolución patrón 

concentrada de cafeína de 1,000 g/L preparar en 5 matraces de 25 mL, 

disoluciones de 0,020 g/L, 0,040 g/L, 0,080 g/L, 0,100 g/L y 0,120 g/l, utilizando 

como disolvente la disolución preparada en el punto 1, y agitando convenientemente 

para asegurar su homogeneidad. 

 

3.- Preparar y conectar el sistema cromatográfico: 



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