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Procedimientos para el estudio de muestras diferentes al esputo


Contenido gástrico:

El procesamiento del contenido gástrico, secreción o lavado bronquial obtenido por broncoscopia u otro método, la secreción cervical, líquido menstrual, material de legrado, etc., así como secreciones purulentas y exudados turbios, se procesan igual que el esputo. En el caso del contenido gástrico, sino se va a procesar de inmediato, es necesario neutralizarlo inmediatamente después de haber sido extraído, con 1 mg de bicarbonato de sodio o de fosfato trisódico anhidro por cada ml de contenido gástrico, y conservarse en refrigeración por no más de 24 horas.

Orina:

La orina constituye un producto patológico que suele ser pobre en micobacterias. Por lo que se hace necesario llevar a cabo una concentración de la misma. Debe recogerse toda la orina de la primera micción de la mañana, previa higiene externa con agua, durante 3 días consecutivos. Para aislar micobacterias en orina, deben procesarse no menos de 200 a 250 mL de orina

Procedimiento

- Decantar la muestra hasta dejar 100 ml.

- Adicionar 1 ml de solución de albúmina de huevo y homogenizar.

- Adicionar 4 ó 5 gotas de ácido sulfosalicílico al 20% y homogenizar

- Distribuir en 2 tubos Corning el volumen de muestra.

- Centrifugar a 3000 x g durante 30 min.

- Decantar el sobrenadante.

- Resuspender el sedimento en 5 ml de agua destilada estéril.

- Procesar mediante el método de ácido sulfúrico al 4% e inocular en 4 tubos de medio LJ.


Ganglios y otros tejidos procedentes de biopsias o necropsias:


Cuando se tiene la seguridad de que el material no ha sido contaminado, se siembra directamente en los medios de CU, tomando el material de la parte más purulenta se deben inocular por lo menos 4 tubos de LJ con el asa o el bisturí. Si el material se supone contaminado o se desea examinar mayores porciones, debe procederse a desmenuzarlo y descontaminarlo.

Los ganglios linfáticos, las biopsias u otro tejido obtenido por resección quirúrgica deben cortarse en pequeños trozos con un bisturí o tijeras estériles para su posterior maceración. Este procedimiento logra liberar a las micobacterias del enrejado en que están contenidas, que al homogenizar queda disponible para su crecimiento en el medio de CU.

El procesamiento es por el método de ácido sulfúrico al 4% e inocular en 4 tubos de medio LJ.


Líquido cefalorraquídeo (LCR):


La obtención de este material debe hacerse por personal médico. Se procesa todo el líquido extraído del paciente y se enviará en envase estéril.

Por lo general, los líquidos cefalorraquídeos se reciben para investigar TB cuando ya han sido examinados para el diagnóstico de otras enfermedades. De cualquier manera, debe considerarse material no contaminado, centrifugarse y descartarse el sobrenadante. Con el sedimento se siembran por lo menos 4 tubos de LJ.

Además, debe extenderse material de frotis y buscar BAAR, lo cual es de suma importancia para este tipo de muestra.


Líquido pleural, ascítico, sinovial y otros:

Si se han obtenido en condiciones asépticas, se puede agregar, a cada 10 mL, 2 ó 3 gotas de ácido sulfosalicílico al 20% estéril, agitar y centrifugar durante 20 min. Se inoculan con el sedimento no menos de 4 tubos de LJ.

En caso de considerarse contaminada la muestra, se suspende el sedimento en 2 mL de agua destilada o solución salina al 0,85 % estéril y se procesa por el método de ácido sulfúrico al 4%.

En los casos de exudados pleurales o ascíticos estériles pueden sembrarse también en medios concentrados, para restituir volumen con la muestra, si se dispone de medios líquidos como el de Sula o Middlebrook.


Heces:

Las heces serán recogidas después de 3 días sin tratamiento.

Se toman varios gramos de heces en un mortero y se homogenizan con agua estéril. Se filtran y se procesan por el método usual de flotación de Willis con cloruro de sodio concentrado. Se deja 2 h en reposo, entonces se recoge el líquido de la superficie con una cuchara (como se hace para el examen de huevos de parásitos). Esta porción se procesa igual que el esputo y se siembra en LJ.


Sangre:

La sangre constituye un producto patológico estéril, un proceso de descontaminación, además de ser innecesario, provocaría la eliminación de los bacilos contenidos en la misma. Por otro lado, y debido a la condición aerobio - estricto de este género microbiano, si existieran micobacterias en la sangre de un paciente, éstas se ubicarían en el espacio intracelular de los eritrocitos (donde se halla combinada la proteína Hemoglobina con el oxígeno). Esto hace que el procesamiento se dirija hacia la hemólisis de las células sanguíneas, permitiendo la liberación de las micobacterias, y por ende, su disponibilidad para el crecimiento en medio de CU

Se toman asépticamente de 4 a 6 mL de sangre. Se depositan en un tubo de tapa de rosca con anticoagulante, previamente esterilizado; se agita el tubo, para que la sangre no se coagule, con movimientos suaves de inversión. A esta sangre se añade igual cantidad de agua destilada estéril, bilis o desoxicolato de sodio al 10% para provocar la lisis de los glóbulos rojos,.

El tubo se centrifuga a una velocidad no menor de 3000 g y se decanta el líquido sobrenadante. Después de agitado, se siembra o inocula el sedimento en varios tubos con medio de CU sólido (UIT, Middlebrook, Stonebrink, Ogawa, etc). Asimismo, se puede sembrar en medios líquidos (Middlebrook, Dubos, Sula, etc).

A este sedimento también se le debe hacer un frotis y colorearlo con Ziehl-Neelsen y examinarlo microscópicamente en busca de BAAR.


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