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dentro de intervalos mucho más grandes de concentraciones; no es raro un intervalo de 

1 000 veces o más.

En un espectrofluorómetro también se hace la medición en ángulo recto con la 

dirección de la radiación incidente. Pero en lugar de usar filtros, el instrumento contiene 

dos monocromadores, uno para seleccionar la longitud de onda de excitación y el otro para 

seleccionar la longitud de onda de fluorescencia. La longitud de onda de excitación de una 

fuente continua puede ser barrida y la fluorescencia medida a determinada longitud de 

onda para obtener un espectro de longitudes de onda de excitación. Esto permite establecer 

la longitud de onda de excitación máxima. A continuación se ajusta la longitud de onda 

de excitación en su valor máximo y la longitud de onda de emisión se puede barrer para 

establecer la longitud de onda de emisión máxima. Cuando se barre este espectro, suele 

haber un “máximo disperso” que corresponde a la longitud de onda de la excitación.

En los espectrofluorómetros es difícil corregir las variaciones de intensidad de la 

fuente o la respuesta del detector a diferentes longitudes de onda; entonces se suelen pre-

parar curvas de calibración para determinado conjunto de condiciones. Ya que la intensidad 

de la fuente o la respuesta del detector pueden variar de un día al siguiente, se suele cali-

brar el instrumento midiendo la fluorescencia de una solución estándar y ajustar la ganan-

cia para llevar la lectura del instrumento hasta el mismo valor. Con frecuencia se usa una 

solución diluida de quinina en ácido sulfúrico diluido como patrón de calibración.

A veces se requieren espectros “absolutos” de un compuesto fluorescente para cal-

cular eficiencias cuánticas para diferentes transiciones. Para eso se necesitaría hacer co-

rrecciones punto por punto debido a las variaciones en la señal registrada, debidas a va-

riaciones en los parámetros instrumentales. Se encuentran disponibles instrumentos 

comerciales que proporcionan “espectros corregidos”. En esos aparatos se ajusta la varia-

ción de la intensidad de la fuente con la longitud de onda para que la muestra se irradie 

con energía constante, y también corrigen variaciones en la respuesta del detector. El es-

pectro de emisión que se registra se presenta directamente en cuantos de fotones emitidos 

por unidad de ancho de banda.

16.16  Sensores ópticos: fibras ópticas

En años recientes se ha despertado el interés por el desarrollo de sensores ópticos que fun-

cionan en forma muy parecida a los sensores electroquímicos (capítulo 15). Los sensores 

ópticos fueron posibles con la llegada de los cables de fibra óptica, que transmiten luz a lo 

largo de un cable flexible (guía de onda) o “tubo de luz”. Las fibras ópticas se desarrollaron 

para la industria de las comunicaciones, y pueden transmitir luz a grandes distancias, pero 

han demostrado su valor en la transmisión de luz a espectrómetros y en el desarrollo de 

sensores selectivos de analito, acoplando las composiciones químicas adecuadas a las fibras. 

Cuando se usan fibras ópticas no es necesario que una muestra se lleve al espectrómetro, 

porque la luz se puede transmitir a la muestra y regresar a través de los cables.

PROPIEDADES DE LAS FIBRAS ÓPTICAS

En la figura 16.32 se representa la construcción de un cable de fibra óptica. Está formado 

por un núcleo cilíndrico que funciona como guía de onda rodeado por un material de re-

vestimiento, de mayor índice de refracción, y por una capa amortiguadora protectora. La 

luz se transmite a lo largo del núcleo por reflexión interna total en la interfase núcleo-re-

vestimiento. El ángulo de aceptación, 



a

, es el máximo ángulo para que la radiación se 

refleje por completo para determinada diferencia de índices de refracción entre el núcleo 

y el revestimiento. La luz que entra formando un ángulo mayor que 

 no será transmitida, 



a

 define la abertura numérica (NA) de la fibra:

  

(16.27)

En un espectrofluorómetro los 

filtros se sustituyen con mono-

cromadores de barrido. Se 

puede registrar el espectro de 

excitación (similar al espectro 

de absorbencia) o el de emisión.

Los cables de fibra óptica per-

miten que la muestra esté ale-

jada del espectrómetro.

NA

n

ext 

sen

a

n

1

2

n

2

2

16.16  SENSORES ÓPTICOS: FIBRAS ÓPTICAS

 

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