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19.1  PRINCIPIOS DE LAS SEPARACIONES CROMATOGRÁFICAS

 

557

partículas cromatográficas (fase estacionaria) y disolvente. Se agrega la fase móvil de di-

solvente a la columna y se deja que salga lentamente por su parte inferior. Los componen-

tes individuales interactúan con la fase estacionaria con diversas intensidades,

 

X

m

 

É X

s

 (19.1)

El equilibrio de distribución se define con la constante de distribución

 

K

c

 

[X]

s



[X]

m

 (19.2)

donde [X]

s

 es la concentración del componente X sobre o en la fase estacionaria, y [X]

m

 es 

su concentración en la fase móvil. Esta constante de equilibrio está gobernada por la tem-

peratura, la clase de compuesto y las fases estacionaria y móvil. También se llama coeficiente 

de distribución o coeficiente de partición en la cromatografía de partición. Los solutos con 

un valor grande de K

c

 serán retenidos con mayor fuerza por la fase estacionaria que los que 

tienen un valor pequeño. Como resultado, estos últimos avanzarán por la columna (serán 

eluidos) con mayor rapidez. Debido a que no se alcanza un equilibrio verdadero entre las 

dos fases, habrá algo de retraso de las moléculas de analito entre ellas, lo cual dependerá 

de la rapidez de flujo de la fase móvil y del grado de interacción con la fase estacionaria; 

el resultado será el ensanchamiento de la banda. La figura 19.2 muestra la distribución de 

dos especies, A y B, a lo largo de una columna al bajar por ella. Si se mide la concentración 

de las moléculas eluidas al salir de la columna y se grafica en función del tiempo o del 

volumen de fase móvil que pasó por la columna, el resultado será un cromatograma. Ob-

sérvese que a medida que las sustancias bajan por la columna cada banda se ensancha más; 

las áreas bajo los máximos permanecen constantes. Los efectos del ensanchamiento de 

bandas se explicarán más adelante. En la cromatografía moderna se coloca un detector al 

Figura 19.1. 

Principio de las 

separaciones cromatográficas.

Concentración en la fase estacionaria

+ B

A

B

A

B

A

B

Distancia a lo largo de la columna

Figura 19.2. 

Distribución de 

dos sustancias, A y B, a lo 

largo de una columna croma-

tográfica en una separación 

cromatográfica típica.

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