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CAPÍTULO 19 

CROMATOGRAFÍA: PRINCIPIOS Y TEORÍA

final de la columna que mida automáticamente los compuestos eluidos e imprima un cro-

matograma de los máximos correspondientes a las sustancias separadas.

Aunque hay diversas formas de cromatografía, este modelo simplificado tipifica el 

mecanismo de cada una; es decir, nominalmente hay equilibrio entre dos fases, una móvil 

y una estacionaria (nunca se alcanza realmente el equilibrio). Al agregar continuamente 

más fase móvil, los analitos se distribuirán entre las dos fases y terminarán por ser eluidos, 

y si la distribución es lo suficientemente distinta para las diversas sustancias, terminarán 

por separarse.

19.2  Clasificación de las técnicas cromatográficas

Los procesos cromatográficos se pueden clasificar de acuerdo con el proceso de equilibrio 

que se maneje, el cual estará gobernado por la fase estacionaria. Algunas bases para el equi-

librio son: 1) adsorción, 2) partición, 3) intercambio iónico y 4) penetración en poros.

CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN

La fase estacionaria es un sólido sobre el que se adsorben los componentes de la muestra. La 

fase móvil puede ser un líquido (cromatografía líquido-sólido) o un gas (cromatografía 

gas-sólido); los componentes se distribuyen entre las dos fases por una combinación de 

procesos de sorción y desorción. La cromatografía en capa delgada (TLC, thin-layer chro-

matography) es un ejemplo especial de cromatografía de adsorción donde la fase estacio-

naria es un plano en la forma de un sólido soportado sobre una placa inerte, y la fase 

móvil es un líquido.

CROMATOGRAFÍA DE PARTICIÓN

La fase estacionaria en la cromatografía de partición es un líquido soportado en un sólido 

inerte. Aquí la fase móvil también puede ser un líquido (cromatografía de partición líquido-

líquido) o un gas (cromatografía gas-líquido, GLC).

En el modo normal de operaciones de la partición líquido-líquido se usa una fase 

estacionaria polar (como metanol sobre sílice) con una fase móvil no polar (como hexano). 

Esto favorece la retención de compuestos polares y la elución de compuestos no polares, 

y se denomina cromatografía de fase normal. Si se usa una fase estacionaria no polar y 

una fase móvil polar, entonces se retienen más los solutos no polares y los solutos polares 

se eluyen con mayor facilidad. A esto se le llama cromatografía de fase inversa o reversa

y en realidad es la más común.

CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO

Y DE EXCLUSIÓN DE TAMAÑO

En la cromatografía de intercambio iónico se usa una resina de intercambio iónico como 

fase estacionaria. El mecanismo de separación se basa en equilibrios de intercambio iónico. 

En la cromatografía de exclusión de tamaño se separan moléculas solvatadas de acuerdo 

con su tamaño gracias a su facilidad de penetrar en una estructura como la de una criba 

(la fase estacionaria).

Las anteriores son clasificaciones arbitrarias de las técnicas cromatográficas. Algunos 

tipos de cromatografía, al conjuntarse, se consideran una técnica aparte, como la croma-

tografía de gases, que puede considerarse como una cromatografía gas-sólido o una gas-

líquido. En cualquier caso los equilibrios sucesivos que operan son los que determinan 

hasta qué grado el analito se atrasa o se mueve con el eluyente (fase móvil). En la croma-

tografía en columna, la columna puede empacarse con partículas pequeñas que constituyen 

En la cromatografía de fase nor-

mal se separan los componentes 

polares sobre una fase estacio-

naria polar. En la cromatografía 

de fase inversa, los compuestos 

no polares se separan en una 

fase estacionaria no polar. ¡Esta 

última es más común!

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