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20.5 Mediciones cuantitativas

Las concentraciones de los solutos eluidos son proporcionales a las áreas bajo los máximos 

registrados. Las integraciones electrónicas en los instrumentos de cromatografía de gases 

imprimen las áreas de los máximos y generalmente también sus tiempos de retención. 

También es posible medir la altura del máximo para construir una curva de calibración. 

Siempre debería ser posible establecer la linealidad de una curva de calibración.

El método de adiciones de estándar es una técnica útil para efectuar calibraciones, 

en especial para muestras ocasionales. A una o más alícuotas de la muestra se les mezcla 

con una concentración conocida del estándar, y el incremento en el área del máximo es 

proporcional a la cantidad de estándar agregado. Este método tiene la ventaja de verificar 

que el tiempo de retención del analito desconocido sea igual al del estándar.

Un método más importante en el análisis cuantitativo es el uso de estándares inter-

nos. En él, a la muestra y a los estándares se les adiciona una cantidad igual de soluto 

cuyo tiempo de retención sea cercano al del analito. La relación del área del estándar o 

del analito a la del estándar interno se usa para preparar la curva de calibración y deter-

minar la concentración desconocida. Este método compensa variaciones de parámetros 

físicos, en especial inexactitudes en el pipeteado o la inyección de volúmenes de muestras 

del orden de microlitros. Además, la retención relativa permanecería constante, aun cuando 

la rapidez de flujo pueda variar.

EJERCICIO EN HOJA DE CÁLCULO:

CALIBRACIÓN CON ESTÁNDARES

Cuando se detiene a un conductor por sospecha de conducir bajo la influencia del alcohol 

se determina el contenido de éste en sangre para ver si rebasa el límite legal permitido. La 

medición del aliento alcohólico se suele hacer en los arrestos rutinarios de conductores por 

ser no invasivo, y se aplica un factor para convertir la concentración de alcohol en la san-

gre, aunque éste a su vez está sujeto a variaciones biológicas en los individuos. En los 

casos en que hay un accidente, lesión o muerte, el alcohol en la sangre se suele determinar 

directamente analizando una muestra de sangre por cromatografía de gases.

A una muestra de 5.00 mL de sangre de un sospechoso se le agregan 0.500 mL de 

un estándar interno con 1% de propanol. Una porción de 10 

L de la mezcla se inyecta 

al cromatógrafo de gases y se registra el área del máximo. Los estándares se manejan del 

mismo modo. Se obtienen los siguientes resultados:

 % 

EtOH  Área 

del  Área 

del

 

(peso/vol) 

máximo de EtOH 

máximo de PrOH

 0.020 

 

114 

457

 0.050 

 

278 

449

 0.100 

 

561 

471

 0.150 

 

845 

453

 0.200 

070 

447

 Se 

desconoce 

 

782 

455

Preparar una hoja de cálculo para construir una curva de calibración de la relación de áreas 

EtOH/PrOH en función de la concentración de EtOH y calcular la concentración del pro-

blema y su desviación estándar. Véanse las ecuaciones 16.18 a 16.21 y la hoja de cálculo 

que les sigue en el capítulo 16 para recordar los cálculos estadísticos.

Se acostumbra agregar un están-

dar interno a las soluciones del 

estándar y de la muestra. Se 

mide la relación del área del 

máximo del analito con la del 

máximo del estándar interno, y 

permanecerá inalterada por pe-

queñas variaciones en el volu-

men inyectado y las condiciones 

cromatográficas.

20.5 MEDICIONES 

CUANTITATIVAS

 

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