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CAPÍTULO 21 

CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS

(véase figura 21.14). El flujo de calor y del gas desolvatan las gotitas cargadas y producen 

moléculas del analito cargado que entran al espectrómetro de masas. La ionización por elec-

troaspersión puede producir iones con cargas múltiples, y la cantidad de carga aumenta al 

elevarse el peso molecular. Por ejemplo, en las proteínas y péptidos se producen sitios con 

cargas múltiples. Eso permite determinar pesos moleculares relativamente grandes, muy por 

encima del límite de la relación m/z normal, de 2 000 a 3 000 dalton en el espectrómetro de 

masas cuadripolar, porque la relación m/z decrece, por ejemplo en un factor de 5. Se pueden 

medir proteínas con 50 000 dalton o más. Naturalmente, debe evaluarse el número de cargas. 

Entre las técnicas para hacerlo está comparar dos estados de carga que difieren en una sola 

carga y resolver ecuaciones simultáneas; otra es identificar especies con la misma carga, pero 

diferentes masas de aducto; por último, buscar relaciones m/z para grupos isotópicos resuel-

tos. La electroaspersión es adecuada para compuestos cargados, polares o básicos.

Como su nombre lo indica, en la ionización química a presión atmosférica se usa 

una interfase de ionización a presión atmosférica. La interfase es parecida a la que se usa en 

electroaspersión, pero se utiliza una descarga de corona para ionizar al analito en una región 

a presión atmosférica. (Nota: Ésta es diferente a la fuente de ionización química que se des-

cribió en el capítulo 20 para gases-masas.) La ionización en fase gaseosa de analitos menos 

polares es más eficiente que la ionización por electroaspersión, pero su manejo de masas se 

limita a unos 2 000 dalton. La ionización por electroaspersión y la ionización química a 

presión atmosférica son complementarias. La ionización química a presión atmosférica ha 

sustituido en gran parte a la ionización térmica como interfase en instrumentos comerciales.

El filtro de masas cuadripolar es el analizador de masas que más se usa en líquidos-

masas por su bajo costo, su robustez y por ser compacto. En años recientes se han desarro-

llado analizadores de tiempo de vuelo para conectarlos a ionizadores por electroaspersión.

ALGUNAS APLICACIONES DE CROMATOGRAFÍA

DE LÍQUIDOS DE ALTA EFICIENCIA

La técnica de HPLC se usa mucho en numerosas aplicaciones clínicas, forenses, ambientales 

e industriales. Ha sustituido muchos procedimientos de cromatografía de gases en análisis 

forenses en selección de drogas. Se pueden encontrar ejemplos de tipos específicos usando 

las bases de datos de cromatogramas que aparecen en los sitios Web al final del capítulo 19. 

Por ejemplo, en la base de datos Supelco se puede consultar la determinación de explosivos 

extraídos del agua usando microextracción en fase sólida (SPME, capítulo 18), o bien, la 

caracterización rápida de medicamentos que se venden sin receta, y muchos otros ejemplos.

21.2  Cromatografía por exclusión de tamaño

La cromatografía por exclusión de tamaño (llamada también cromatografía molecular o en 

gel) es un método en el que la fase estacionaria es una malla o criba molecular. Se usa 

Las moléculas que pueden pe-

netrar en las partículas de gel se 

separan de acuerdo con su ta-

maño y forma. Las demás pasan 

directo por la columna.

Al vacío

Eluyente de LC

Alto voltaje

Cono

N

2

A espectrometría

de masas

Figura 21.14. 

Interfase de 

ionización por electroasper-

sión, para líquidos-masas.

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