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que los aminoácidos con carga positiva y negativa quedarán retenidos en una de las co-

lumnas. Esos grupos se pueden seguir subdividiendo al cambiar el pH.

Moore y Stein [J. Biol. Chem.192 (1951) 663] pudieron separar exitosamente hasta 

50 aminoácidos y compuestos afines en una sola columna de intercambio catiónico con 

Dowex 50, usando una combinación de control de pH y de temperatura (la temperatura 

afecta los equilibrios que se producen).

Los analizadores automáticos de aminoácidos basados en separaciones por inter-

cambio iónico se encuentran disponibles en el comercio. La elución de cada aminoácido 

queda registrada automáticamente al medir el color que forma el aminoácido con la nin-

hidrina durante la elución. Al operar a presiones de varios cientos de psi son capaces de 

hacer separaciones en unos 200 min. Han demostrado su valor en bioquímica como auxi-

liares en la elucidación de la estructura de las proteínas. Los fragmentos de proteína se 

degradan hasta aminoácidos, que entonces deben determinarse.

EFECTO DE LOS AGENTES COMPLEJANTES: SEPARACIÓN DE IONES 

METÁLICOS EN COLUMNAS DE INTERCAMBIO ANIÓNICO

Muchos metales se pueden separar en columnas de intercambio aniónico al convertirlos en 

aniones por complejamiento. El agente complejante es un anión, como cloruro, bromuro o 

fluoruro. Los agentes complejantes sin carga también afectan el equilibrio si forman un com-

plejo que deba disociarse antes de que el metal se intercambie o si cambian de tamaño. Mu-

chos agentes complejantes son ácidos o bases débiles, o son sales de ellos, por lo que con 

frecuencia se produce una interdependencia complicada entre el pH y el complejamiento.

Algunas de las mejores separaciones de metales se han logrado en columnas de in-

tercambio aniónico. Se agrega un ácido complejante en alta concentración para formar 

complejos aniónicos con los metales. El ácido clorhídrico concentrado forma complejos 

clorados con todos los metales comunes, a excepción de los alcalinos, alcalinotérreos, 

Al(III), Ni(II) y Cr(III), por lo que todos éstos se pueden adsorber en una columna de 

intercambio aniónico de amonio cuaternario.

21.4 Cromatografía iónica

La aplicación de las técnicas de HPLC a la cromatografía de intercambio iónico se llama 

cromatografía iónica. En esta técnica se combinan el poder separador del intercambio 

iónico con la universalidad del detector de conductividad. En la cromatografía ordinaria de 

intercambio iónico, el uso del detector de conductividad se encuentra limitado por la alta 

conductancia de fondo del eluyente (milimhos). En 1970, William Bauman, de la Dow 

Chemical Company, sugirió una forma de eliminar el eluyente de fondo con una segunda 

columna de intercambio iónico permitiendo así la detección de los iones del analito con un 

detector muy sensible (micromhos). Esta segunda columna se llama columna supresora

Para analizar aniones, ésta es una columna de intercambio catiónico, en la forma ácida, y 

para el análisis de cationes, ésta es una columna de intercambio aniónico en su forma básica. 

En la cromatografía iónica se usan resinas intercambiadoras débiles, aunque también se 

usan las fuertes. En la figura 21.15 se muestran los principios de funcionamiento.

Supóngase que se separa la sal MA de un anión A



 en una resina intercambiadora 

de aniones y se eluye con NaOH. Al eluir de la columna se producirá una mezcla de MA 

y NaOH. Al pasarla por la columna supresora intercambiadora de cationes, se efectuarán 

las reacciones siguientes:

 RzSO

3



H



 

 M



 

 A



 

→ RzSO

3



M



 

 H



 

 A



 RzSO

3



H



 

 Na



 

 OH



 

→ RzSO

3



Na



 

 H

2

O

Los complejos clorados de iones 

metálicos negativamente carga-

dos en solución de HCl son re-

tenidos por las resinas de 

intercambio aniónico. Se diso-

cian y se eluyen diluyendo el 

ácido.

La cromatografía iónica es la 

forma de alto rendimiento para 

la cromatografía de intercambio 

iónico.

La columna supresora remueve 

los iones del eluyente e inter-

cambia los iones del analito por 

H



 (cationes) u OH



 (aniones), 

por lo se puede usar un detector 

de conductividad de alta sensibi-

lidad.

21.4 CROMATOGRAFÍA 

IÓNICA

 

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