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CAPÍTULO 21 

CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS

placa a diferentes velocidades que dependen de su solubilidad y de su grado de retención 

por la fase estacionaria. Después del desarrollo, las manchas individuales de soluto se ven 

o se hacen visibles tratándolas con un reactivo que forme un derivado colorido. En gene-

ral, las manchas se mueven a cierta fracción de la velocidad con la que se mueve el disol-

vente y se caracterizan por su valor de R

f

:

 

R

f

 

distancia que recorre el soluto

distancia que recorre el frente del disolvente

 (21.5)

donde las distancias se miden desde el centro donde se depositó la muestra, en el lado 

inferior de la placa. El frente de disolvente será una línea que cruza la placa. La distancia 

que recorre el soluto se mide desde el centro de la mancha del soluto, o a su densidad 

máxima si se presenta corrimiento. Debido a pequeñas variaciones en las placas, siempre 

se aconseja determinar el valor del R

f

 en cada juego de placas.

DESARROLLO DEL CROMATOGRAMA

En la figura 21.17 se ve un ejemplo de dispositivo para cromatografía de capa delgada. Se 

traza una raya delgada con un lápiz que cruce la placa algunos centímetros arriba del fondo 

y sobre ella se practican los puntos de aplicación (las manchas) para referencia futura en 

mediciones del R

f

. La mancha debe ser tan pequeña como sea posible para tener una se-

paración máxima y un mínimo de arrastre (o prolongación excesiva). Lo mejor es hacerlo 

gota a gota, teniendo una pistola de aire caliente (por ejemplo, una secadora de cabello) 

para evaporar el disolvente después de cada gota. La placa se coloca en una cámara con 

su lado inferior sumergido en el disolvente de desarrollo. Se debe usar una cámara cerrada 

(a presión) para saturar la atmósfera con el disolvente y evitar que éste se evapore de la 

placa al ir subiendo. El desarrollo puede durar 10 min a 1 h, pero no requiere tiempo de 

operador. La cantidad de desarrollo dependerá de la complejidad de la mezcla de solutos 

que se esté separando. Si se usa una placa ancha, se pueden depositar varias muestras y 

patrones a lo largo del lado inferior para desarrollarlas al mismo tiempo.

Se pueden lograr tiempos de desarrollo de 5 min usando pequeños portaobjetos como 

placas de TLC, y se pueden hacer separaciones preliminares con ellas para determinar có-

modamente las condiciones óptimas de desarrollo. Lo normal es que los tamaños de mues-

tra vayan de 10 a 100 

g por punto de aplicación (por ejemplo, 1 a 10 L de una solución 

al 1%). Los puntos de aplicación de la muestra deben tener 2 a 5 mm de diámetro.

Tapa de la cámara

Cámara

Línea con lápiz que marca el lugar

de los puntos de aplicación

Puntos de aplicación

con la muestra

Eluyente

Figura 21.17. 

Disposición 

para la cromatografía de capa 

delgada.

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