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CAPÍTULO 21 

CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS

tico en la misma dirección que la del flujo electroosmótico. Para los cationes no se nece-

sita un cambio, porque se mueven en la misma dirección y tienen tiempos totales de 

migración muy rápidos. Pero por otro lado, un ion 

1 pequeño tendría migración total 

más lenta que un ion 

1 grande. La movilidad electroforética del ion 1 pequeño es alta, 

y eso hace que la velocidad total sea lenta porque su movilidad electroforética lo aleja del 

detector. Para los aniones, la pared del capilar se puede tratar con una sal de alquilamonio, 

R

4

N



, por ejemplo, bromuro de cetiltrimetilamonio. Los iones R

4

N



 se fijan a los grupos 

silanol con carga negativa en la superficie, y a su vez crean una doble capa de aniones, lo 

cual invierte el flujo electroosmótico (hacia el ánodo). Naturalmente, el detector se coloca 

entonces en el extremo del ánodo. Otro método para los aniones es trabajar con un pH 

bajo, donde los grupos silanol no se ionizan, dominando entonces la migración electrofo-

rética de aniones hacia el ánodo.

SEPARACIÓN DE MOLÉCULAS NEUTRAS: MECC

Ya se mencionó que las moléculas neutras migran juntas en forma electroosmótica. Por 

esta razón no se separan en la clase de electroforesis capilar que se ha descrito, que se 

llama electroforesis capilar de zona (CZE, capillary zone electrophoresis). Si se agrega a 

la fase móvil un agente tensoactivo aniónico que forme micelas, como dodecilsulfato de 

sodio, entonces sí se podrán separar las moléculas neutras. Arriba de cierta concentración, 

llamada concentración micelar crítica (CMC), las moléculas del tensoactivo se autoagre-

garán formando micelas en las que las cadenas hidrofóbicas se dirigirán al interior dejando 

un núcleo no polar en el cual los solutos neutros se pueden separar. Los grupos hidrofíli-

cos, con carga negativa, forman una coraza externa.

Los solutos neutros se separan entre las micelas y el amortiguador en forma parecida 

a lo que sucede en HPLC, y las diferentes moléculas reaccionarán de manera distinta. 

Como las micelas tienen carga negativa, su migración electroforética será hacia el ánodo 

aunque el flujo neto será hacia el cátodo debido al flujo electroosmótico, aunque a menor 

velocidad. Se debe recordar que las moléculas neutras se mueven a la velocidad electro-

osmótica. Cuando se equilibran con la micela, se vuelve más lento su movimiento. Cuanto 

más tiempo pasen dentro de las micelas, será mayor el tiempo de llegada al detector. A 

esta técnica se le llama cromatografía electrocinética capilar micelar (MECC, micellar 

electrokinetic capillary chromatography); es una forma de cromatografía donde las micelas 

funcionan como fase seudoestacionaria. También se afecta el movimiento de los cationes 

24 22 20 18 16 14

Tiempo (min)

Intensidad

15

14

B

13

12

11

10

9

8

7

5

4

3

2

B

B

1

B

6

B

Figura 21.23. 

Separación de entre 2 y 7 attomoles de 18 aminoácidos por electroforesis capi-

lar de zona. La separación se impulsa con un potencial de 25 kV y se usa una solución amorti-

guadora de pH 10. La inyección fue a 2 kV durante 10 s. Aminoácidos: máximo 1, Arg; 2, Lis; 

B son máximos relacionados con el banco del reactivo; 3, Leu; 4, Ile; 5, Trp; 6, Met; 7, Fen, 

Val, His y Pro; 8, Tre; 9, Ser; 10, Cis; 11, Ala; 12, Gli; 13, Tir; 14, Glu y 15, Asp. (Según N. J. 

Dovichi y Y. F. Cheng., Am. Biotech. Lab., febrero, 1989, reproducción autorizada.)

Micela

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