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CAPÍTULO 22 

MÉTODOS CINÉTICOS DE ANÁLISIS

La importancia de K

m

 se ilustra en la figura 22.3 (parecida a la figura 22.2). Cuando 

la velocidad de reacción aumenta rápidamente con la concentración del sustrato, K

m

 es 

pequeña (curva 1). El sustrato que da la K

m

 más baja para una enzima dada, con frecuen-

cia (pero no necesariamente) es el sustrato natural de la enzima, y éste es el origen del 

rápido incremento en la rapidez al aumentar la concentración de sustrato. Una K

m

 pequeña 

indica que la enzima se satura con pequeñas concentraciones de sustrato, y una K

m

 grande, 

al contrario, indica que se requieren altas concentraciones de sustrato para llegar a la ra-

pidez de reacción máxima. En esos casos sería difícil alcanzar la rapidez de orden cero 

con respecto al sustrato, y el sustrato no sería el adecuado para la determinación de la 

enzima.

ESPECIFICIDAD DE LA ENZIMA

En general, hay cuatro tipos de especificidad enzimática: 1) especificidad absoluta, en la 

que la enzima sólo cataliza una reacción; 2) especificidad de grupo, cuando la enzima 

actúa sobre moléculas que contienen ciertos grupos funcionales, como amino, fosfato o 

metilo; 3) especificidad de enlace, cuando la enzima actúa sobre determinado tipo de 

Una K

m

 pequeña equivale a una 

rapidez grande de reacción y a 

una fácil saturación del sustrato.

Solución

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

31

32

33

34

A

B

C

D

E

Gráfica de Lineweaver-Burk

[S], M

R, ΔA/min 1/[S], M

-1

1/R, ΔA

-1

min

0.00400 0.093

250

10.753

0.0100

0.231

100

4.329

0.0400

0.569

25

1.757

0.0800

0.758

12.5

1.319

0.120

0.923

8.333

1.083

0.160

0.995

6.25

1.005

0.240

1.032

4.167

0.969

Celda C3 = 1/A3. Copiar hacia abajo.

Celda D3 = 1/B3.  Copiar hacia abajo.

Pendiente (ΔA

-1

min/M

-1

) =

0.0395

Intersección = 1/R

máx

 = 

0.737

R

máx

 (ΔAmin

-1

)

 

= 1/D14 = 

1.357

K

(M)

 

= pendiente x R

máx

 = D13*D15 = 0.0536

Gráfica de Lineweaver-Burk

y = 0.0395x + 0.7369

R

2

 = 0.9979

0

2

4

6

8

10

12

0

100

200

300

1/[S], M

--1

1/R, 

Δ

A

--1

min

 

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9/12/08   16:01:31

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