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22.2 ENZIMAS 

CATALIZADORAS

 

653

siempre que se deje tiempo suficiente para que la conversión sea completa. Véase también 

la discusión acerca de los electrodos enzimáticos en el capítulo 13 con una descripción de 

otro método para medir sustratos.

EJEMPLO DE ANÁLISIS ENZIMÁTICOS

Se usan mucho los métodos espectrofotométricos para medir las reacciones enzimáticas. 

El producto de la reacción puede tener un espectro de absorción muy diferente al del 

sustrato, permitiendo una medición simple del producto o del sustrato. En otros casos se 

emplea un reactivo que comunique de color por reacción con el producto o el sustrato, y 

Ejemplo 22.2

El contenido de alcohol en la sangre de un individuo se determinó enzimáticamente ha-

ciendo reaccionar el etanol con NAD



 en presencia de la enzima alcohol deshidrogenasa 

para formar NADH (véase tabla 22.1). Se midió la rapidez de formación del NADH a 340 

nm (véase figura 22.4). Se leyeron las siguientes absorbancias para un estándar de 0.100% 

de alcohol (peso/vol) y para el problema, el cual se trató de la misma manera. Usar una 

hoja de cálculo para determinar la rapidez de cambio de absorbancia, y con ella la con-

centración del problema.

T (s) 

A

est

 

A

prob

  0 

0.004 

0.003

 20 

0.052 

0.036

 40 

0.099 

0.070

 60 

0.147 

0.098

 80 

0.201 

0.132

100 0.245 0.165

Solución

 

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

A

B

C

D

E

F

G

T, seg

A est

Neto

ΔA/ΔT

ΔA/ΔT

A prob

Neto

0

0.004

0.003

20

0.052

0.048

0.00240

0.036

0.033

0.00165

40

0.099

0.095

0.00238

0.070

0.067

0.00168

60

0.147

0.143

0.00238

0.098

0.095

0.00158

80

0.201

0.197

0.00246

0.132

0.129

0.00161

100

0.245

0.241

0.00241

0.165

0.162

0.00162

Prom.:

0.00241

0.00163

Desv. Est.:

0.00003

0.00004

Concentración de la muestra:

0.068 %(wt/vol)

Celda C3  = B3-$B$2

Copiar hacia abajo

Celda D3 =  C3/A3

Copiar hacia abajo

Celda F3 = E3-$E$2

Copiar hacia abajo

Celda G3 = F3/A3

Copiar hacia abajo

Celda D8 = PROMEDIO(D3:D7)

Celda G8 = PROMEDIO(G3:G7)

Celda D9 = DESVEST(D3:D7)

Celda G9 = DESVEST(G3:G7)

Celda C10 =0.1*(G8/D8)

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