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EXPERIMENTOS

mL con SrCl

2

 al 1%.) Prepare estándares de 0, 3, 4, 5, 6 y 8 ppm de Ca, cada uno 

también conteniendo SrCl

2

 al 1%, 6.9 meq/L de Na y 0.21 meq/L de K.

24

 

 

Prepare una curva de calibración con la absorbancia de los estándares y con ella 

determine la concentración de calcio en el problema. Use una hoja de cálculo.

Método de adiciones de estándar

Se puede usar este método en lugar del descrito antes para analizar los problemas y de-

mostrar su utilidad para compensar efectos de la matriz. Diluya su problema como se 

describió antes, usando agua destilada para obtener una concentración aproximada de 5 

ppm de Ca (1:20 para suero, por ejemplo, 2.5 mL diluidos a 50 mL con SrCl

2

 al 1%). Con 

una pipeta transfiera alícuotas de 10.0 mL del problema diluido en tres tubos de ensayo o 

matraces limpios y secos. A ellos agregue 50.0, 100 y 150 

L, respectivamente, de la 

solución estándar de 500 ppm de calcio (o 25.0, 50.0 y 75.0 

L de una solución de 1 000 

ppm, si está disponible). De este modo aumenta la concentración de calcio en el problema 

diluido en 2.5, 5.0 y 7.5 ppm, respectivamente, dependiendo de la concentración exacta 

del estándar, con lo que se encuadra el problema. Se puede considerar que los cambios de 

volumen son intrascendentes. Use una micropipeta adecuada, si la consigue (por ejemplo, 

una pipeta Eppendorf de 50 

L o una pipeta de Finn), o bien una pipeta graduada de 0.1 

mL. Para que la exactitud sea óptima debe calibrar la pipeta (véase el capítulo 2).

Ponga en cero el instrumento con agua destilada y aspire el problema diluido y las 

muestras con adición de estándar. Los aumentos de absorbancia en estas últimas se deben 

al calcio adicionado. Use una hoja de cálculo para preparar una gráfica de absorbancia en 

función de la concentración añadida de calcio (comenzando en añadido 

 0, es decir, la 

muestra). Con la abscisa al origen de la gráfica determine la concentración de calcio en 

la muestra diluida. Vea la hoja de cálculo en el capítulo 17 para la preparación de una 

gráfica de adiciones de estándar y el cálculo del problema. Calcule la concentración en la 

muestra original. ¿Cómo se determina la interferencia de fosfatos en este método?

EXPERIMENTO 30  DETERMINACIÓN ESPECTROMÉTRICA

DE SODIO POR EMISIÓN DE FLAMA

Principio

Se compara la intensidad de emisión de sodio en una flama, a 589.0 nm, con la de unos 

estándares. Si se dispone de un instrumento de estándar interno se mide la relación de la 

emisión de sodio a litio.

Soluciones y reactivos necesarios

1.  Solución stock estándar de NaCl (1 000 ppm de Na).  Seque aproximadamente 1 g 

de NaCl a 120

C durante 1 h y enfríelo durante 30 min. Pese y disuelva 0.254 g de 

NaCl en agua y diluya a 1 L. Debe tener cuidado para evitar contaminación por sodio, 

en especial debido al agua y a los utensilios de vidrio. Debe correrse un blanco para 

corregir el sodio que llegue a estar presente en el agua.

2.  Solución de estándar interno de LiNO

3

 de 1 000 ppm de Li.  (No se requiere litio 

si se utiliza un instrumento de intensidad directa, y no uno de estándar interno.) Di-

suelva 0.99 g de LiNO

3

 en agua y diluya a 100 mL.

24

 Se puede preparar una solución para almacenaje de 140 meq/L de Na y 4.1 meq de K (20 veces la concentración 

de la solución estándar) disolviendo 8.1 g de NaCl y 0.21 g de KCl en 1 L de agua. Esa solución contiene las 

concentraciones normales de Na y K en el suero, y compensa la interferencia por ionización, debida e esos elemen-

tos en el suero. Diluya esa solución 1:20 en los estándares.

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